使用HPLCONE® 5C18PLUS ( 4.6*250mm ，5µm)色谱柱，参照2020年《中国药典》高效液相色谱法对盐酸林可霉素的测定，检测杂质、林可霉素B 、盐酸林可霉素，可满足实验要求。
本品为6-（1-甲基-反-4-丙基-L-2-吡咯烷甲酰氨基）-1-硫代-6，8-二脱氧-D-赤式-α- D-半乳辛吡喃糖甲苷盐酸盐一水合物。按无水物计算，含林可霉素（C18H34N2O6S）不得少于82.5%
使用HPLCONE® 5C18PLUS ( 4.6*250mm ，5µm)色谱柱，参照2020年《中国药典》高效液相色谱法对盐酸林可霉素的测定，检测杂质、林可霉素B 、盐酸林可霉素，可满足实验要求。
供试品溶液的制备 取本品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含林可霉素4mg的溶液。
对照溶液的制备 精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。
色谱条件
色谱柱：HPLCONE® 5C18PLUS ( 4.6*250mm ，5µm)
流动相：以0.05mol/L硼砂溶液（用85%磷酸溶液调节pH值至6.1）-甲醇（1∶1）
流 速：1mL/min
柱 温：室温
检测波长：214nm
进样量：10μl
系统适用性要求 供试品溶液色谱图中，林可霉素峰保留时间约为16分钟，林可霉素峰与林可霉素B峰（与林可霉峰相对保留时间约为0.4～0.7）间的分离度应大于2.6。林可霉素峰与相邻杂质峰间的分离度应符合要求。
测定法 精密量取供试品溶液与对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。
限度 供试品溶液色谱图中如有杂质峰，除林可霉素B峰外，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（2.0%），小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计。
林可霉素B 照高效液相色谱法（通则0512）测定。
供试品溶液 取本品适量（约相当于林可霉素50mg），精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含林可霉素2mg的溶液。
测定法 精密量取供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。
限度 供试品溶液色谱图中，林可霉素B的峰面积不得过林可霉素与林可霉素B峰面积和的5.0%
含量测定
对照品溶液 取林可霉素对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含林可霉素2mg的溶液。
测定法 精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算供试品中C18H34N2O6S的含量。
色谱谱图
| 峰号 | 化合物名称 | 保留时间 | 峰面积 | 峰面积% | 理论塔板数（USP） | 拖尾因子 | 分离度（USP） |
| 1 | 林可霉素B | 8.377 | 205880 | 2.520 | 11067 | 1.005 | / |
| 2 | 杂质 | 11.426 | 23161 | 0.283 | 11601 | 1.021 | 8.209 |
| 3 | 林可霉素 | 15.900 | 7942342 | 97.197 | 12033 | 0.832 | 8.911 |
结论：使用HPLCONE® 5C18PLUS ( 4.6*250mm ，5µm)色谱柱，参照2020年《中国药典》高效液相色谱法对盐酸林可霉素的杂质测定，可满足实验要求