使用HPLCONE® 5C18D ( 4.6*250mm ，5µm)色谱柱，参照《中国药典》（2020年版）高效液相色谱法对二至丸的含量测定，检测特女贞苷（C31H42O17），可满足实验要求。
对照品溶液的制备 取特女贞苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含90μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品适量，研细，取约0.5g，精密称定，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理45分钟（功率350W，频率40kHz），放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5~10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性要求 理论板数按特女贞苷峰计算应不低于7000
色谱条件
色谱柱 HPLCONE® 5C18D ( 4.6*250mm ，5µm)
流动相 以甲醇为流动相A，以水流动相B=36：64
流 速 1 mL/min
柱 温 室温
波 长 224nm
进样量 10μL
色谱谱图
1、供试品
| 峰号 | 保留时间 | 化合物名称 | 峰面积 | 高度 | 理论塔板数 | 拖尾因子 |
| 1 | 25.689 | 特女贞苷峰 | 13223601 | 336017 | 9879 | 1.06 |
2、对照品
| 峰号 | 保留时间 | 化合物名称 | 峰面积 | 高度 | 理论塔板数 | 拖尾因子 |
| 1 | 26.036 | 特女贞苷峰 | 6039319 | 152854 | 10051 | 1.03 |
结论
使用HPLCONE® 5C18D ( 4.6*250mm ，5µm)色谱柱，按照《中国药典》（2020年版）高效液相色谱法对二至丸的含量测定，能满足实验要求。