本品为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根茎。春、秋二季采挖,除去须根,晒干。
使用COSMOSIL 5C18-MS-II色谱柱,参照《中国药典》高效液相色谱法对甘草提取物进行含量测定,检测甘草苷、甘草酸,可满足实验要求。
对照品溶液的制备 取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量,精密称定,加70%乙醇分别制成每1ml含甘草苷20μg、甘草酸铵0.2mg的溶液,即得(甘草酸重量=甘草酸铵重量/1.0207)。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇100ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
色谱条件:
色谱柱:COSMOSIL 5C18-MS-II (4.6mmI.D*250mm)
流动相: A :乙腈 B:0.05%磷酸
B 浓度.81→81%(0-8min), 81→50%(8-35min),
50→0%(35-36min),
0→81%(36-40min)
流速:1ml/min
柱温:25℃
波长: UV 237nm
进样量:10μL
理论板数按甘草苷峰计算应不低于5000。
色谱谱图:
1、甘草对照品:
1;Liquiritin(甘草苷):27μg/ml
2;Glycyrrhizic Acid(甘草酸):200μg/ml
2、甘草提取物
1;Liquiritin(甘草苷)
2;Glycyrrhizic Acid(甘草酸)
结论:COSMOSIL 5C18-MS-II( 4.6mmI.D*250mm)色谱柱,按照中国药典方法对甘草提取物进行含量测定,能满足实验要求。