中国药典 2020 版-决明子含量测定

2022-07-12 359

使用COSMOSIL 5C18-MS-II色谱柱,参照《中国药典》高效液相色谱法对决明子提取物进行含量测定,检测大黄酚、橙黄决明素,可满足实验要求。

本品为豆科植物钝叶决明Cassia obtusifolia L.或决明(小决明)Cassia tora L.的干燥成熟种子。秋季采收成熟果实,晒干,打下种子,除去杂质。
使用COSMOSIL 5C18-MS-II色谱柱,参照《中国药典》高效液相色谱法对决明子提取物进行含量测定,检测大黄酚、橙黄决明素,可满足实验要求。
对照品溶液的制备  取大黄酚对照品、橙黄决明素对照品适量,精密称定,加无水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液制成每1ml含大黄酚30μg、橙黄决明素20μg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备  取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,加热回流2小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25ml,蒸干,加稀盐酸30ml,置水浴中加热水解1小时,立即冷却,用三氯甲烷振摇提取4次,每次30ml,合并三氯甲烷液,回收溶剂至干,残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液使溶解,转移至25ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得
色谱条件
色谱柱:COSMOSIL 5C18-MS-II (4.6mmI.D*250mm)
流动相:A 乙腈   B 0.1%磷酸溶液
              B conc. 60%(0-15min)
                 60→10%(15-30min)
                  0%(30-40min)
流  速:1 mL/min
柱  温:25 ℃
波  长:UV 284nm
进样量:10μL
理论板数按橙黄决明素峰计算应不低于3000。
色谱谱图
1、对照品
1:Chrysophanol (大黄酚):32.6μg/ml
2:Aurantio-obtusin (橙黄决明素):22.6μg/ml
2、决明子提取物
1:Chrysophanol (大黄酚)
2:Aurantio-obtusin (橙黄决明素)
结论:COSMOSIL 5C18-MS-II( 4.6mmI.D*250mm)色谱柱,按照中国药典方法对决明子提取物进行含量测定,能满足实验要求。
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