近年来备受关注的抗体药物开发中,必须进行蛋白质结合糖链的特征分析。使用HPLC进行糖链的高灵敏度分析时可以使用各种衍生试剂,其中2-氨基安息香酸(2-AA)是代表性的糖的衍生试剂的一种。以下是使用聚合物基质氨基柱Asahipak NH2P-50 4E利用HILIC模式分析使用2-AA衍生后的糖链(葡萄糖均聚物)的应用实例。使用2-AA衍生可以用荧光检测器检测,G1(葡萄糖)的检测灵敏度可以达到amol级别。
Sample : 50 μL
2-AA Labeled glucose homopolymer ladder (2-AA Labeled dextran hydrolysate ladder)10 nM (G1 conc.)
Column : Shodex Asahipak NH2P-50 4E (4.6 mm I.D. x 250 mm)
Eluent : (A); 2 % CH3COOH in CH3CN
(B); 5 % CH3COOH + 3 % Triethylamine in H2O
(B %) 30 % to 95 % (2 to 82 min)
Flow rate : 1.0 mL/min
Detector : Fluorescence (Ex. 350 nm, Em. 425 nm)
Column temp. : 40 ℃